Strict Standards: Only variables should be passed by reference in /var/www/bsmy.ru/data/www/bsmy.ru/wp-includes/pomo/mo.php on line 210 Strict Standards: Only variables should be passed by reference in /var/www/bsmy.ru/data/www/bsmy.ru/wp-includes/pomo/mo.php on line 210 Strict Standards: Only variables should be passed by reference in /var/www/bsmy.ru/data/www/bsmy.ru/wp-includes/pomo/mo.php on line 210 Strict Standards: Only variables should be passed by reference in /var/www/bsmy.ru/data/www/bsmy.ru/wp-includes/pomo/mo.php on line 210 Strict Standards: Only variables should be passed by reference in /var/www/bsmy.ru/data/www/bsmy.ru/wp-includes/pomo/mo.php on line 210 Strict Standards: Only variables should be passed by reference in /var/www/bsmy.ru/data/www/bsmy.ru/wp-includes/pomo/mo.php on line 210 Strict Standards: Non-static method Red_Item::get_for_url() should not be called statically, assuming $this from incompatible context in /var/www/bsmy.ru/data/www/bsmy.ru/wp-content/plugins/redirection/modules/wordpress.php on line 31 Strict Standards: Only variables should be passed by reference in /var/www/bsmy.ru/data/www/bsmy.ru/wp-includes/pomo/mo.php on line 210 Strict Standards: call_user_func_array() expects parameter 1 to be a valid callback, non-static method GoogleSitemapGeneratorLoader::Enable() should not be called statically in /var/www/bsmy.ru/data/www/bsmy.ru/wp-includes/plugin.php on line 406 Радиоиммунологический анализ (РИА) | БГМУ

Радиоиммунологический анализ (РИА)

Дисциплина: Микробиология | Комментировать



В качестве метки используются радиоактивные изотопы.
В зависимости от техники постановки выделяют два способа РИА.
1) Техника «жидкая фаза» (классический РИА). Недостаток этой техники постановки — необходимость
специального разделения свободного и связанного меченого антигенов (или антител).
2) Техника «твёрдая фаза».
АГ или АТ известной специфичности связываются на сорбентах (твёрдой фазе) — стенках полистироловой лунки или пластиковой пробирки. На иммобилизованный АГ (АТ) последо-ватепьно сорбируются остальные компоненты ИК.

В зависимости от характера реакции различают следующие методы:
1) Конкурентный метод — метод, основанный на конкуренции АГ.

Компоненты реакции:
а) определяемый АГ (исследуемый материал — кровь, мокрота и др.);
б) идентичный к исследуемому АГ-у антиген, меченый радиоизотопом;
в) специфические АТ-ла известной концентрации, связанные на сорбенте;
г) стандартный АГ (контрольный);
д) буферный раствор.

Сначала в реакцию вводят исследуемый АГ. Происходит образование комплекса АГ-АТ на поверхности сорбента. Сорбент отмывают, затем вводят меченый АГ, Чем больше содержание исследуемого АГ, тем меньше меченого АГ связывается с АТ-м на поверхности сорбента. Концентрацию меченого АГ определяют измерением радиоактивности реакции с помощью счетчиков. Величина радиоактивности реакции будет обратно пропорциональной количеству АГ в исследуемой пробе.

2) Неконкурентный метод.

Компоненты реакции:
а) определяемый АГ;
б) специфический АТ-а известной концентрации, связан-
ные на сорбенте;
в) идентичные к связанному антителу антитела, меченые
радиоизотопом;
г) стандартный АГ;
д) буферный раствор.

К связанным АТ добавляют исследуемый АГ. В процессе инкубации на сорбенте образуются комплексы АГ-АТ. Сорбент отмывают от свободных компонентов и добавляют меченые АТ, которые связываются со свободными валентностями АГ-на в составе комплекса. Величина радиоактивности пропорциональна концентрации исследуемого АГ.

3) «Сэндвич-метод» (непрямой метод) — наиболее распространённый метод.

Компоненты:
а) исследуемая сыворотка (или исследуемый АГ);
б) АГ-ы, связанные на сорбенте (или АТ-ла, связанные на сорбенте при определении АГ-а);
в) диагностические АТ против иммуноглобулинов, меченые радиоизотопами;
г) контрольные сыворотки (или АГ-ы);
д) буферные растворы.

Исследуемые АТ-а (или АГ-ы) реагируют с твердофазными АГ-ми (АТ-ми), после чего инкубат удаляется и в реакцию вводят меченые антиглобулиновые АТ, которые связываются со специфическими комплексами АГ-АТ на поверхности сорбента. Величина радиоактивности реакции прямо пропорциональна количеству исследуемого АТ (или АГ).

Достоинства РИА:
1) высокая специфичность и чувствительность;
2) простота техники постановки;
3) точность количественной оценки результатов;
4) легко поддаётся автоматизации.

Недостаток: использование радиоактивных изотопов.

Нет сходных материалов(